浓缩脱盐离心柱

保存条件：RT。

一．产品介绍

浓缩脱盐离心柱 ,填料颗粒粒径在 57-80微米,适合将分子量在 5KD以下的和分子量 5KD以 上的物质分离开来,对盐和小分子的滞留率在 95%以上,几乎等体积回收,样品不会被稀释,可以在出色地完成蛋白质脱盐的同时保持极高的回收率。无需装柱,代替比较耗时的传统透析处理,以达到快速纯化蛋白质替换蛋白质缓冲液的目的。只需简单的几次离心,即可完成样品的脱盐或缓冲液置换实验。

二．产品用途

1、 脱盐

2、 置换缓冲液

三．产品规格

柱体积0.7毫升;上样量:150-200微升

四．工作环境

pH:2-13;温 度:4-30℃

五．产品特点

1、 操作方便,免去了繁琐的透析过程,15分钟内即可完成样品处理:

2、 建议一次性使用 (也可再生后重复使用),稳定性好,在所有常用缓冲液体 (PBS,Tris-HCl、 碳酸钠一碳酸氢钠等)中稳定。

3、 使用灵活,可根据自身样品体积来适当增减柱体积。

六．操作步骤

1、 加入 600 ul缓冲液溶胀干粉装填料,约 3分钟。

2、 1200× g离 心 3min。 再加入 200u1上 述缓冲液,重复上述平衡操作 2次 。

3、 样品处理。加入需要处理的蛋白样品 (150-200 ul),静置 30S,1200× g离 心 3min,收集回收样品,保存备用。

4、 脱盐柱的再生和保存

1)、 脱盐蛋白后再生:将使用过的脱盐柱,共 4次加入 200 ul含 2M NaC1的 PBS溶液,静置 2min, 1200× g离心 3min。 然后 3次加入 200 uI去离子水,静置 2min,1200× g离心 3min。

2)、 脱盐小分子染料后再生:用20%乙醇溶液不断加入脱盐柱,直至染料完全清洗干净后,再用去离子水或缓冲液清洗即可。

3)、 再生后用于不同蛋白:将使用过的脱盐柱，加入 200 ul含 0.5M NaOH溶液 ,静置 2min,1200 ×g离心 3min。 重复此操作 2-4次 。然后再用去离子水或缓冲液清洗至无NaOH即可。

将处理好的脱盐柱 ,加 入 20%乙醇溶液,保存即可。

六．回收效果

样品脱盐后的回收率与样品的浓度.以及上样体积相关。样品浓度越高,其回收率越高;同时在推荐的样品上样量范围内,上样量越大,其回收率也会随之升高。通常脱盐后蛋白的回收率在 80-95%。

七．注意事项

1、 样品处理量要在柱子处理范围内,过多会导致脱盐不完全,过少会导致样品回收率下降

2、 填料在高浓度醇溶液或饱和盐溶液中会有失水收缩现象,请勿将上述溶液进行过柱;

3、 加样时尽量均匀加至管中心位置;

4、 当样品浓度过低时,需先将样品浓缩到所需体积或所需浓度。

*本试剂仅供实验室研究使用